实时荧光定量PCR（Real Time – PCR，简称RT-PCR，也简称qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光化学物质，利用荧光信号积累实时监测PCR扩增产物并进行定量分析的方法。根据所用荧光化学物质的不同，qPCR可分为荧光染料法（SYBR Green Ⅰ法为代表）和荧光探针法（TaqMan法为代表）。
SYBR Green Ⅰ染料法因具有使用简便，价格便宜等优点而被广泛使用。但其最大的缺点是缺乏特异性，即染料可以与任何dsDNA结合。因此，qPCR反应中有非特异性扩增产物的出现会增加荧光值，影响定量结果的准确性，而TaqMan探针法的出现很好地解决了染料法非特异性的问题。下面，我们一起来了解一下TaqMan探针法qPCR的基本原理及其主要应用。
